高效液相色譜儀測(cè)定蛹蟲(chóng)草培養(yǎng)基中核苷類(lèi)成分

蛹蟲(chóng)草(Cordyceps militaris (L.ex Fr.)Link)又稱(chēng)北蟲(chóng)草、北冬蟲(chóng)夏草，與冬蟲(chóng)夏草同屬異種，有效成分相近，同時(shí)又可以大規(guī)模的人工栽培，現(xiàn)代科學(xué)研究發(fā)現(xiàn)其具有抗癌、增強(qiáng)免疫、降血壓等多種藥理活性?，F(xiàn)已被廣泛應(yīng)用于藥品和保健品中。蛹蟲(chóng)草所含的一類(lèi)重要活性成分是核苷和堿基，包括蟲(chóng)草素、腺苷等。其中腺苷具有改善心腦血液循環(huán)、抑制中樞神經(jīng)遞質(zhì)釋放等多種活性，現(xiàn)已被我國(guó)用作冬蟲(chóng)夏草及其制品和代用品的質(zhì)控指標(biāo)之一；蟲(chóng)草素則具有抗病毒、抑制腫瘤等功效，目前在美國(guó)作為治療白血病藥物的研究已經(jīng)進(jìn)入二期臨床，開(kāi)發(fā)潛力巨大。

 

目前，核苷類(lèi)物質(zhì)的檢測(cè)方法以高效液相色譜儀分析為主，包括正相、反相、質(zhì)譜聯(lián)用等，還有毛細(xì)管電泳分析測(cè)定，但大都只將核苷類(lèi)成分中的1～3 個(gè)作為質(zhì)控指標(biāo)進(jìn)行評(píng)估。本研究在高效液相色譜中采用了正相柱分析，用8 個(gè)核苷類(lèi)成分作為對(duì)照，考察測(cè)定方法的精密度、重復(fù)性和穩(wěn)定性，以此作為各樣品核苷類(lèi)成分的分析方法。

 

人工栽培蛹蟲(chóng)草培養(yǎng)基中含有大量的蟲(chóng)草素，與相應(yīng)的子實(shí)體相比，培養(yǎng)基來(lái)源充足，價(jià)格低廉，作為制備蟲(chóng)草素的原料，可以大大降低成本。但是由于目前栽培的蛹蟲(chóng)草菌種來(lái)源不同，其培養(yǎng)基中蟲(chóng)草素含量是否具有很大的差異，與對(duì)應(yīng)的子實(shí)體中蟲(chóng)草素含量的差異是否存在相關(guān)性等需要進(jìn)一步研究。故本實(shí)驗(yàn)對(duì)市場(chǎng)上冬蟲(chóng)夏草及不同來(lái)源的蛹蟲(chóng)草子實(shí)體中核苷類(lèi)物質(zhì)的含量進(jìn)行分析測(cè)定，并對(duì)同一菌種的子實(shí)體和培養(yǎng)基進(jìn)行核苷類(lèi)成分的比較，分析蛹蟲(chóng)草固體發(fā)酵產(chǎn)物中核苷類(lèi)成分的含量，為蟲(chóng)草相關(guān)制品的開(kāi)發(fā)提供依據(jù)。
 

                                                                      

山東譜析采用高效液相色譜儀法測(cè)定蟲(chóng)草中的核苷類(lèi)成分，優(yōu)化后的色譜條件為YMC-Polyamine 柱（250mm× 4.6mm，5μm）；采用梯度洗脫，流動(dòng)相：乙腈- 水（V/V）：0～15min 為90：10，15～20min 為86.5：13.5，20～30min 為75：25，30～35min 為70：30；流速：1mL/min；柱溫：30℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：259nm；進(jìn)樣量：10μL。結(jié)果表明：胸腺嘧啶、蟲(chóng)草素、尿嘧啶、腺苷、腺嘌呤、尿苷、鳥(niǎo)嘌呤、次黃嘌呤均能得到較好分離，該方法穩(wěn)定性好、精密度高、重現(xiàn)性好，適用于蟲(chóng)草中的核苷類(lèi)成分的分析。經(jīng)分析發(fā)現(xiàn)，蛹蟲(chóng)草子實(shí)體核苷類(lèi)物質(zhì)組成大致相似，但含量差異非常顯著，同時(shí)發(fā)現(xiàn)蛹蟲(chóng)草培養(yǎng)基殘基及固體發(fā)酵產(chǎn)物中蟲(chóng)草素含量較高，其他核苷類(lèi)成分很少，因此認(rèn)定蛹蟲(chóng)草培養(yǎng)基殘基及固體發(fā)酵產(chǎn)物是非常優(yōu)良的分離純化蟲(chóng)草素的原料。

 

以上測(cè)定蟲(chóng)草中的核苷類(lèi)成分高效液相色譜儀方案由山東譜析儀器色譜小編整理制定，不盡事宜歡迎各界朋友共同探討研究。更多分析上的詳細(xì)資料可電話或通過(guò)公司網(wǎng)站了解垂詢，歡迎合作。

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