高效液相色譜儀用檢測波長測定時(shí)一般都選擇在對樣品有最大吸收的波長下進(jìn)行，以獲得最大的靈敏度和抗干擾能力。但應(yīng)特別注意在選擇測定波長時(shí)，必須考慮到所使用的流動(dòng)相的紫外吸收性質(zhì)。也就是說，使用紫外-可見光檢測器時(shí)，溶劑不應(yīng)吸收測定波長的紫外光，樣品測定波長應(yīng)當(dāng)在溶劑紫外吸收波長上限以上。噪聲降至10-4~10-5AU，才能保證檢測的靈敏度，才能用于梯度洗脫。

另外，山東譜析科學(xué)儀器工程師認(rèn)為，檢測波長的選擇涉及到以下2方面的因素：

1、目標(biāo)物質(zhì)在該波長處有較大（往往不是最大）吸收。

2、與目標(biāo)物質(zhì)同時(shí)經(jīng)過檢測器流通池的其他物質(zhì)（主要是流動(dòng)相與樣品溶劑）在該波長有較小吸收。

液相色譜儀使用溶劑吸收波長的上限，就是透過波長的下限。波長的下限規(guī)定為溶劑在以空氣為參比，樣品池厚度為1厘米的條件下，恰好產(chǎn)生1.0吸光度時(shí)相對應(yīng)的波長值，即溶劑透過率為10%時(shí)的波長。

溶劑中如果含有吸收紫外光的雜質(zhì)，同樣會(huì)使檢測背景提高，靈敏度降低，且用作梯度洗脫時(shí)會(huì)引起嚴(yán)重漂移。因此，液相色譜儀系統(tǒng)對溶劑純度要求較高，一般應(yīng)使用分光純或分析純?nèi)軇?，在有條件時(shí)，色譜純?nèi)軇槭走x。應(yīng)注意不能使用化學(xué)純及純度更低的溶劑。有時(shí)需要對溶劑進(jìn)行專門純化處理。