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高效液相色儀(HPLC)譜菜鳥掃盲篇

2021-02-23 08:31:20來源:admin
高效液相色譜(HPLC)是集成化很高的儀器。它包括了泵輸送流動相,六通閥的進樣,色譜柱的分離,檢測器的檢測和記錄積分設備的記錄和數(shù)據(jù)計算構成的。
 
高效液相色譜(HPLC)的工作原理
 
氣相色譜儀用氮氣或者氦氣做載氣,把載氣換成流動相(Mobile phase),流動相也稱為載液。高效液相色儀(HPLC)是通過管路連接這各個部件按,流動相在泵的驅(qū)動下,流經(jīng)色譜的全系統(tǒng)到達廢液,樣品經(jīng)過了流通閥,進入色譜系統(tǒng),在流動相的帶領下,進入色譜柱進行分離。被分離的樣品中各個成分,進入檢測器,被檢測。由記錄儀記錄檢測信號,流經(jīng)廢液。或者被收集。這就是高效液相色譜(HPLC)的整個系統(tǒng)工作描述。
 
高效液相色譜(HPLC)的各系統(tǒng)
 
HPLC是有五大系統(tǒng)構成:動力系統(tǒng),進樣系統(tǒng),分離系統(tǒng),檢測系統(tǒng),數(shù)據(jù)分析和記錄系統(tǒng)構成。
其中:
動力系統(tǒng):泵
進樣系統(tǒng):六通閥和進樣針,或者自動進樣器
分離系統(tǒng):色譜柱
檢測系統(tǒng):檢測器,一般有紫外檢測器,熒光檢測器,示差折光檢測器,MS檢測器等等。
記錄系統(tǒng):電腦工作站等
連接這些設備的都是由一根根不銹鋼管或者PEEK管構成。
 
高效液相色譜(HPLC)的動力系統(tǒng):泵
 
泵是HPLC的動力系統(tǒng)。氣相色譜的動力,實際上是鋼瓶中氣體的壓力。而液體,它只有通過泵的轉(zhuǎn)動而使之流動。
我們做一個類比:血液類比成流動相,心臟類比成泵。血管類比成各不銹鋼管。那么,血液在心臟作為動力系統(tǒng),流經(jīng)著身體的各個系統(tǒng)。如果心臟跳得快點,那么血流量加大,那么血壓升高。同樣,泵流速提高,流動相流量增大,那么色譜系統(tǒng)壓力增高;如果血管被壓迫半堵了,那么同樣的心跳速度,壓力也會增高。同樣道理,如果色譜系統(tǒng)被污染,那么污染物堵在色譜柱頭,或者各連接口等,那么泵同樣的流速,就有可能壓力變大。高效
 
HPLC記錄系統(tǒng)主要記錄色譜圖,并且對色譜圖進行面積計算(積分)。同時可以用軟件計算出其他,比如峰寬,塔板數(shù),拖尾因子等。同時也可以通過輸入稱樣量和稀釋倍數(shù),計算出測試樣品中各組分的含量。

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