高效液相色譜儀由高壓輸液系統(tǒng)、進樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)、記錄系統(tǒng)等五大部分組成（圖1）。分析前，選擇適當?shù)纳V柱和流動相，開泵，沖洗柱子，待柱子達到平衡而且基線平直后，用微量注射器把樣品注入進樣口，流動相把試樣帶入色譜柱進行分離，分離后的組分依次流入檢測器的流通池，最后和洗脫液一起排入流出物收集器。當有樣品組分流過流通池時，檢測器把組分濃度轉變成電信號，經(jīng)過放大，用記錄器記錄下來就得到色譜圖。色譜圖是定性、定量和評價柱效高低的依據(jù)。但操作液相色譜儀時謹記以下注意事項。

1、排氣泡

　　如何排出聚四氟乙烯管道內(nèi)氣泡：

　　排空操作：打開LC-20AT泵排空閥（逆時針90度以上），按Purge鍵，泵開始排

　　空運行。檢查流動相入口聚四氟乙烯管路沒有氣泡后，Purge燈不再閃爍時，關閉LC-20AT泵排空閥。

　　如何排出進樣針內(nèi)氣泡：

　　使用手動進樣器進樣時，在進樣前和進樣后都需用多次清洗進樣針筒，洗針液一般選擇與樣品液一致的溶劑，進樣前必須用樣品液潤洗進樣針筒3遍以上，并排除針筒中的氣泡（進樣針吸取樣品之后，顛倒針管，氣泡會往上跑，猛推一些樣品出去，氣泡即可隨之排出）。

2、流動相：

　　流動相應選用色譜純試劑、高純水，酸堿液及緩沖液需經(jīng) 0.22μm 膜過濾后使用，過濾時注意區(qū)分水系膜和有機相膜的使用范圍； 使用泵時，A、B 兩相中，則 A管道連接藍蓋瓶的水相，B 管道連接藍蓋瓶的有機相。確保每天用重新超聲和超濾過的水和有機相。

3、色譜柱：

　　使用前仔細閱讀色譜柱附帶的說明書，注意適用范圍，如 pH 值、流動相類型等；

　　使用符合要求的流動相；

　　使用保護柱；

　　如所用流動相為含鹽流動相，反相色譜柱使用后，先用水或低濃度甲醇水（如5%甲醇水溶液），再用甲醇沖洗。

　　色譜柱在不使用時，根據(jù)柱子特性和使用要求，用不同溶劑封存。比如，PAH專用柱用乙腈沖洗封柱，取下后緊密封閉兩端保存；不要高壓沖洗柱子；一般用流速 1.0ml/min 沖洗，壓力約 7Mpa。

4、樣品：

　　進樣之前必須用 0.22μm 濾膜過濾，確保樣品中不含固體顆粒；

　　一般盡量用流動相制備樣品液。比如測 PAHs 時，流動相用的是水和已腈，進樣的溶劑也應為水或已腈。

　　手動進樣時，進樣量一般大于 40μl，并且不要含氣泡，針頭外壁要擦凈。

5、壓力

　　操作過程若發(fā)現(xiàn)壓力很小，（一般是在 6-20）則可能管件連接有漏，注意檢查。當出現(xiàn)錯誤警告（各組件指示燈均為紅色），一般為漏液，其中一個感應器中已有溶劑，漏液故障排除后，擦干，點擊On line操作界面中的Instrument/System Off，然后再點擊操作界面中的 Instrument/System On 即可。

　　操作過程若發(fā)現(xiàn)壓力非常高，則可能管路已堵，應先卸下色譜柱，然后用分段排除法檢查，確定何處堵塞后解決。若是保護柱或色譜柱堵塞，可用小流量流動相或以小流量異丙醇沖洗，還可采用小流量反沖的辦法（新柱不提倡），若還是無法通暢，則需換柱；運行過程中自動停泵，可能為壓力超過上限或流動相用完；

6、切記關燈

　　超過2小時以上不做實驗時，從工作站將檢測器燈關掉（燈的壽命有限）。

7、使用登記：

　　使用者須認真履行液相色譜儀使用登記制度，出現(xiàn)問題及時報告，不要擅自拆卸儀器。